Tipp 93:
Wie bleiben Fabs in Lösung aktiv?
Antwort 4
"Die von mir in funktionsfähigem Zustand bei -20 °C weggefrorenen Fabs fallen aus und haben danach auch ihre Funktionsfähigkeit verloren. Wie kann ich Fabs für längere Zeit in löslichem Zustand stabilisieren? Gibt es bessere Möglichkeiten als die Zugabe von 2 % BSA und 0,1 % Triton-X 100?"
Antwort 4:
"Warum sollte man es nicht so anpacken wie die Firmen, die Antikörper verkaufen:
- Lyophilisieren (dazu müssen allerdings die Bedingungen getestet werden, sprich: Puffer, Zusätze etc.).
- Lagerung in 50 % Glycerol bei -20 °C, da friert das Fragment nicht ein. Darüber hinaus wären möglich:
- Gar nichts tun, bei 4 °C lagern und schnell arbeiten, evtl. Azid zusetzen (sofern das bei den weiteren Versuchen nicht stört).
- Einfrieren zum Beispiel mit Zusätzen von Ethylenglykol oder DMSO (das soll manchmal was bringen, hat bei meinen Proteinen jedoch noch nie geklappt).
Meine persönlichen Favoriten sind die Punkte 2 und 3.
Herzliche Grüße, Ihr
Matthias Nestler.
Leibniz Institute for Age Research, Fritz Lipmann Institute (FLI), Jena
- früher: Institut für Molekulare Biotechnologie, IMB)
Letzte Änderungen: 11.01.2006